¾È³çÇϽʴϱî?
Á¦³ë¸¶ÀÎ ÇÁ·ÎÅ×¿È ¼ºñ½ºÀÔ´Ï´Ù.
ÇöÀç Á¦³ë¸¶Àο¡´Â nanoLC - Q star °¡ settingµÇ¾î ÀÖÀ¸³ª, ¾ÈÁ¤ÀûÀÎ ¼ºñ½º¸¦ À§ÇØ ÃÖÀûÈ°úÁ¤À» °ÅÄ¡°í ÀÖ½À´Ï´Ù. ¾à 2°³¿ù ÈÄ¿¡´Â º»°ÝÀûÀÎ ¼ºñ½º°¡ °¡´ÉÇϸ®¶ó°í »ý°¢ÀÌ µË´Ï´Ù.
ÇöÀç·Î¼ °¡´ÉÇÑ °ÍÀº MALDI-TOF¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ ºÐ¼®Àε¥, ¸»¾¸ÇϽŠµÎ°¡ÁöÀÇ Á¶°Ç¿¡¼ ¼·Î´Ù¸¥ mass spectrumÀÌ °üÂûÀÌ µÇ¸é ±× peptideÀÇ cysteinÁ¸Àç ¿©ºÎÈ®Àΰú ÇÔ²² inter-molecular disulfied bondÂü¿©ÀÇ ¿©ºÎ¿¡ ´ëÇÑ Çؼ®À» ÇÒ ¼ö ÀÖÀ¸¸®¶ó »ý°¢µË´Ï´Ù.
´Ù¸¸ ¿øÇÏ´Â peptide°¡ ¹°¸®ÀûÀÎ ¼ºÁú»ó ´Ù¸¥ peptide¿ÍÀÇ competition¿¡ ÀÇÇؼ »ó´ëÀûÀ¸·Î ³·Àº intensity·Î °üÂûÀÌ µÇ°Å³ª detectionÀÌ µÇÁö ¾ÊÀ¸¸é ¼º°øÀûÀÎ Çؼ®ÀÌ µÇÁö ¾ÊÀ» °ÍÀÔ´Ï´Ù.
ÀÌ ºÎºÐÀº ½ÃµµÇغÁ¾ß ±×·² °¡´É¼ºÀÇ ¿©ºÎ°¡ ÆÇ´ÜÀÌ µË´Ï´Ù.
ÀÌ·± Á¡À» °¨¾ÈÇϽþî, °ËÅäÇϽŠÈÄ ÀÇ·Ú¿©ºÎ¸¦ ¸ÞÀÏ·Î ´Ù½ÃÇѹø ¾Ë·ÁÁÖ½Ã¸é °¨»çÇÏ°Ú½À´Ï´Ù.
±×¸®°í c-terminal¸¸ µû·Î sequencingÀ» ÇÏÁö´Â ¸øÇÏ°í, internal peptideÀÇ ÀϺθ¦ sequencingÇÏ°í ÀÖ½À´Ï´Ù.
ºÐ¼®·á´Â ȨÆäÀÌÁö¸¦ ÂüÁ¶ÇÏ½Ã¸é °¨»çÇÏ°Ú½À´Ï´Ù.
°¨»çÇÕ´Ï´Ù.
ÀÌÈ£Âù ´ÔÀÇ ¿øº»±Û
***********************************************************
¾È³çÇϽʴϱî.
±¸Á¶¸¦ ¾Ë°íÀÖ´Â ÀçÁ¶ÇÕ ´Ü¹éÁúÀÇ ±¸Á¶È®ÀÎÀ» ÀÇ·ÚÇÏ·Á ÇÕ´Ï´Ù.
±¸Á¶È®ÀÎÀ» ÇÏ·Á°í ÇÏ´Â ´Ü¹éÁúÀº ºÐÀÚ·®ÀÌ ¾à 50000 Á¤µµµÇ´Â heavy chain 2°³¿Í 20000 Á¤µµµÇ´Â light chain 2°³°¡ cystein bondµé·Î link µÇ¾îÀÖ´Â ´Ü¹éÁú ÀÔ´Ï´Ù.
ÀÌ ´Ü¹éÁúÀ» tripsinÀ¸·Î È¿¼ÒºÐÇØÇÑ °Ëü¿Í, DTT·Î cystein bond¸¦ ȯ¿øÇÑ ÈÄ ¿ª½Ã tripsinÀ¸·Î È¿¼ÒºÐÇØÇÑ °Ëü¸¦ °¢°¢ LC/MS·Î ÃøÁ¤ÇÏ°Ô µÇ¸é º¯ÈÇÏ´Â peak¸¦ ÃßÀûÇØ Mass·Î peptide sequencingÀ» ÇÑ ÈÄ linkµÈ cystein bondÀÇ À§Ä¡¸¦ È®ÀÎÇÒ ¼ö ÀÖ´Â °ÍÀ¸·Î ¾Ë°í ÀÖ½À´Ï´Ù.
ÀÌ·¯ÇÑ ºÐ¼®À» ±Í»ç¿¡¼µµ ¼öÇàÇÒ ¼ö ÀÖ´ÂÁö ¾Ë°í½Í½À´Ï´Ù.
¶ÇÇÑ È¿¼ÒºÐÇØÇÑ ÈÄ heavy chain°ú light chainÀÇ C-terminal peptideÀÇ sequencingµµ °¡´ÉÇÑÁö ¾Ë°í½Í½À´Ï´Ù.
ºÐ¼®ÀÌ °¡´ÉÇÑÁö¿Í ºñ¿ëÀÌ ¾ó¸¶Á¤µµ µå´ÂÁö ¾Ë·ÁÁֽñ⠹ٶø´Ï´Ù.
±×·³ ¼ö°íÇϼ¼¿ä.
***********************************************************
|
|